jueves, 24 de noviembre de 2011

METODO DE CONCENTRACION-FLOTACION DE FAUST

S.P.M                                                                                    S.E.M.S
          CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO industrial
                                   Y de servicios No.199
Nombre del alumno: Gerardo Pérez Meneses          Fecha: 9/9/11
Nombre del profesor: Vicente Martínez Fragoso
         “METODO DE CONCENTRACION-FLOTACION DE FAUST”

Fundamento:
Este método se utiliza solución de zinc, cuya densidad especifica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: Necátor 1.055, Tricocéfalo 1.150, Áscaris fértil 1.110 y facilita que los huevos livianos de estos helmintos, con menor peso específico que la solución, se concentren y floten.
La concentración adecuada aconsejada es la que usa como reactivo una solución acuosa de sulfato Zn al 33% con una densidad al 1.180. El agua utilizada diluye y lava la materia fecal. El filtrado con gasa doblada y evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en delgada película la superficie del líquido centrifugado con los huevos livianos de algunos helmintos.
Material:  
-Portaobjetos                                               -Sol. Acuosa de sulfato de Zn.
-Cubreobjetos
-Gasas
-Tubos de ensayo
Técnica:
1.-Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.
2.-Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrifuga, ayudándose con un embudo pequeño.
3.-Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1 min.

4.-Decantar el líquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente. Resuspender el sedimento.  
5.- Repetir el procedimiento 2 veces hasta que el líquido sobrenadante este listo.

6.-Decantar nuevamente el líquido sobrenadante reemplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 min. a 1500 rpm.
                                                  
7.-Tomar de 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del líquido. Colocarlos en un portaobjetos y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar un cubreobjetos.

8.-Examinar al microscopio y reportar los resultados.

OBSERVACIONES:
Bueno en mi equipo logramos observar distintos residuos alimenticios, tal vez en algunos de nuestros frotis hubiera habido algunos quistes o huevecillos, pero como apenas estamos aprendiendo a distinguir lo que tenemos en nuestros frotis no los pudimos identificar.
Bueno en los frotis que realizamos identificamos:
-Jabones                                   -Fibras musculares digeridas
-Tejido elástico
-Celulosa vegetal 



COMENTARIO:
Este método nos es de mucha ayuda ya que hace flotar a los huevecillos, larvas, quistes y trofozoitos y así no examinar toda la muestra, sino solamente una porción de ella para dar el resultado en menos tiempo y se podría decir que más eficaz.   

COPROPARASITOSCOPICO DIRECTO

S.E.M                                                                                      D.G.E.T.I
Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de servicios No. 199
                       VALORACION INTEGRAL CLINICA
                 “COPROPARASITOSCÓPICO  DIRECTO”
Nombre del Alumno: Gerardo Pérez Meneses
Nombre del Profesor: Vicente Martínez Fragoso
Grado: 3º Sem.                Grupo: DM

METODO DIRECTO: FROTIS

FUNDAMENTO:
Este método solo sirve para evidenciar la presencia de un determinado parasito, y se trata de un método cualitativo que no permite conocer el número de formas larvarias que hay por cada gramo de heces y por lo tanto la carga parasitaria.
FROTIS FRESCO:
Es un método rápido pero poco seguro. Tienen posibilidad de falsos negativos, por lo que es necesario repetir. Permite observar la motilidad de los microorganismos: amibas y otros flagelados. Detecta quistes y huevos de helmintos. Precisa una concentración.

MUESTRA BIOLOGICA: Heces fecales fresca.
MATERIAL                                                 SUSTANCIAS
-Portaobjetos                                   -Sol. Fisiológica al 0.9%
-Cubreobjetos                                  -Sol. De Yodo
-Pipeta Pasteur
-Vaso de precipitado
-Microscopio




PROCEDIMIENTO:
1.- Sobre un portaobjetos bien limpio se coloca una pequeña porción de materia fecal.

 2.-Se agrega una gota de Sol. Fisiológica.

3.- Se coloca el portaobjetos.
4.- Se observa primero sin teñir.
5.- En otro portaobjetos limpio se repite el mismo procedimiento pero ahora se tiñen con la Tinción de Yodo.






Es importante que los frotis no sean densos, sino transparentes. Y que se haga la observación con diferentes muestras.

Tras la observación de trofozoitos se utiliza la Tinción de Yodo que tiñe quistes y destaca sus detalles. (Los trofozoitos mueren y resultan inidentificables)

La observación se hace siempre con el objetivo Seco Débil (10x) y con poca luz; al encontrarse estructuras sospechosas, se observa con el objetivo Seco Fuerte (40x).

OBSERVACIONES:
Cuando utilizamos primero la solución fisiológica en los frotis pudimos observar cristales de ácidos  grasos y una célula vegetal.

Cuando repetimos el procedimiento pero en lugar de la solución fisiológica utilizamos la Tinción con Yodo pudimos observar  una fibra en espiral.
        
S.E.M.                                                                                          D.G.T.I.   CENTRO  DE BACHILLERATO  TECNOLOGICO  INDUSTRIAL Y DE
                                   SERVICIOS  No. 199
Nombre del alumno: Gerardo  Pérez  Meneses.
Nombre del profesor: Vicente Martínez Fragoso.
Grado: 3 sem.                                Grupo: DM

“METODO DE CONCENTRACION POR SEDIMENTACIÓN RITCHIE.”

INTRODUCCION:
Como su nombre lo dice el método de concentración por sedimentación Ritchie se basa en la concentración de quistes y huevecillos que con ayuda de la centrifuga y de algunas sustancias que en el desarrollo de esta práctica le mostraremos hacen que al realizar el frotis la mayoría de lo que logremos observar sea los elementos parasitarios que deseemos ver.
Unas ventajas de este método es que concentra a los quistes y huevecillos y no los deforma para así, al ser observadas en el microscopio podamos reconocer mejor los quistes y huevecillos de los parásitos intestinales.

MATERIAL Y EQUIPO:                                                   SOLUCIONES:
-Centrifuga                                                                     -Sol. Salina isotónica
-Tubos de ensaye cónicos de 15 ml.                         -Sol. De formaldehido al 10%
-Gasa                                                                         -Éter
-Embudo
-Vaso de precipitado
-Aplicadores de madera
-Pipetas Pasteur con bulbo
-Portaobjetos
-Cubreobjetos
-Microscopio
METODO:
1.- De la muestra tomar con la ayuda de un aplicador de madera 1 gr. aproximadamente de la materia fecal y ponerla en un vaso de precipitado que ya contenga 10 ml de solución salina para homogenizarla.  

2.-Se debe filtrar la suspensión a través de la gasa que ya está colocada sobre el embudo depositando el filtrado en el tubo de ensaye cónico.

3.-Se centrifuga la suspensión durante 2 min. a 2000 rpm.





4.-Se tiene que decantar el sobrenadante y re suspender el sedimento con solución salina, centrifugando, decantando y re suspendiendo 2 veces más.

5.-Cuando se haya terminado, al último sedimento se le agrega 10 ml. de sol. de formaldehido al 10 % se mezcla y se deja reposar 10 min.



6.-Se le añade después 5 ml. de éter, se tapa el tubo con el tapón de caucho y se agita fuertemente durante 30 seg.



7.-Despues de agitarse se centrifuga durante 2 min. a 2000 rpm.


8.-Cuando se a terminado de centrifugar en nuestro tubo se pueden observar 4 capas:
-éter en la superficie
-un tapón de restos fecales
-formaldehido
-sedimento en el fondo, conteniendo los elementos parasitarios.
9.-Se decanta el sobrenadante.

10.-Se introduce la pipeta Pasteur tomando con cuidado una gota del sedimento y colocarlo en el portaobjetos.

11.-Se debe añadirle una gota de yodo lugol y homogenizarlo con ayuda de la esquina de un cubre y cubriéndolo con el mismo.


12.-Se observa la preparación en el microscopio con los objetivos de 10x y de 40x.
CONCLUCION:
Al haber realizado esta práctica, a mi parecer, se me hizo que tiene mayor eficacia que el método de Faust que aunque se realiza mayor procedimiento el resultado es el que esperamos (exacto).

RESULTADO:
Como esperábamos, en nuestra muestra pudimos observar a varios quistes y al igual algunas células vegetales pero lo que se observaba en mayor cantidad eran los quistes.

sábado, 1 de octubre de 2011

PRACTICA 7


S.E.P.                                                                                D.G.E.T.I.
     CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO INDUSTRIAL Y DE
                                   SERVICIOS No.199
Nombre del alumno: Gerardo Pérez Meneses.
Nombre del profesor: Vicente Martínez Fragoso.
             Grado: 3º                           Grupo: DM
         
                               “TECNICA DE STOLL”


INTRODUCCION:
 El diagnóstico parasitológico se fundamenta en el conocimiento de la biología del parásito y la identificación del mismo a través de las técnicas de laboratorio que nos permita su visualización para identificar su estructura observada, como perteneciente a una determinada especie. Después de identificar un parásito,  puede ser necesario determinar la intensidad de la  infestación.
Es aquí donde se utiliza la técnica de Stoll que es utilizada para el conteo de huevecillos de varias especies de helmintos, que se realiza al saber la cantidad de heces para así después de contar los huevecillos realizar la operación correspondiente para determinar el número de parásitos.


MATERIAL:                                                               SUSTANCIAS:
- Tubos de ensaye cónicos de 15 ml.                  –Hidróxido de sodio al 0.1N.
-Palillo aplicador
-Cuentas de vidrio
-Microscopio
-Portaobjetos
-Cubreobjetos                       


PROCEDIMIENTO:
1.- En un tubo de ensaye cónico se agrega 5.6 ml. de hidróxido de sodio.








2.-Con la ayuda de un palillo aplicador agregar materia fecal hasta que el nivel del líquido llegue a 6 ml.
3.- Añadir 5 cuencas de vidrio, después tapar con firmeza y agitar hasta que las heces se hayan desecho por completo.
  
    
4.- Ya que las heces estén disueltas por completo, se sigue agitando por un min. más y se toma 0.075 (una gota) de la suspensión colocándola en un portaobjetos.






5-Se coloca el cubreobjetos y se observa al microscopio con el objetivo de 40x.



RESULTADO:
Aunque este método sea para el conteo de huevecillos en esta ocasión lo utilizamos para observar y comparar los distintos microorganismos y células que se encuentran en las heces.
En nuestro frotis pudimos localizar residuos vegetales diversos y fibras vegetales diversas en espiral.